pH-sensitive IgG labeling reagents Max(Green)

1. UA070122 与抗体孵育

1.1 使用去离子水，将冻干粉形式的 UA070122 根据溶解方法进行复溶。

1.2 用细胞培养基制备足够体积的 4X待测抗体工作溶液（受试浓度的四倍，受试浓度根据前期流式条件摸索）。例如：2μg/ml可能是抗体的良好起始测试浓度，因此 4X工作溶液为 8μg/ml。

1.3 用细胞培养基制备足够体积的4X UA070122 工作溶液。待测抗体与 UA070122 摩尔比 1:2。

1.4 将4X待测抗体工作溶液和4X UA070122 工作溶液按 1:1 的体积比混合。室温避光孵育15min- 1h，得到 Ab- UA070122 复合物2X工作液。

2. Ab- UA070122 复合物与细胞孵育

2.1细胞处理：收集、洗涤细胞，使用完全培养基调整细胞浓度，悬浮细胞 1-2×10^5 cells/mL 的浓度，贴壁细胞 0.5-1×10^5cells/mL 的浓度，96 孔板每孔加入 100μL 细胞悬液。

2.2 孵育：每孔加入 100μL Ab- UA070122 复合物 2X 工作液，37℃ 5% CO2 培养箱中培养。

3. 流式检测

培养 18-24h 后(可根据抗体实际内吞时间调整），收集细胞进行流式检测抗体的内吞效果，使用 FITC 或AF488 通道检测

Avoid vigorous vortex after reconstitution.

Avoid repeated freeze-thaw cycles.