利用NK细胞激活：靶向NKG2D/CD314通路

免疫检查点抑制剂（ICI）如何改变了癌症治疗，还有哪些挑战尚待解决？

ICI已经彻底改变了免疫肿瘤学领域，使部分癌症患者能够实现持久的免疫控制。然而，由于肿瘤免疫逃逸机制的存在，许多患者仍未能从中获益。要克服这些限制，需要创新的联合治疗策略，以增强抗肿瘤免疫力或靶向肿瘤微环境（TME）中的免疫逃逸通路。自然杀伤（NK）细胞作为这一努力中新兴的主力军，因其强大的抗肿瘤能力而日益受到关注。其中最有前景的方向之一，是靶向NKG2D受体（也称为CD314）及其配体——该通路在NK细胞激活和肿瘤识别中处于核心地位。

为何NK细胞处于免疫肿瘤学的前沿？

NK细胞是先天性免疫效应细胞，在识别和清除恶性细胞中扮演关键角色。与T细胞不同，NK细胞无需预先致敏即可识别威胁。其活性受激活性和抑制性受体信号平衡的调控。近年来，NK细胞逐渐成为免疫治疗研究的前沿。目前正在开发多种策略，如单克隆抗体、过继性NK细胞移植以及嵌合抗原受体NK（CAR-NK）细胞，以最大限度地发挥其抗肿瘤潜力。

尤其是CAR-NK细胞，相比CAR-T细胞具有多个优势，包括寿命较短可减少脱靶效应，以及不同的细胞因子分泌谱（例如可产生IFN-γ和GM-CSF，而不会引发严重的细胞因子风暴）。然而，它们在实体瘤中的疗效仍然有限，主要原因是免疫抑制性的TME以及NK细胞在肿瘤中的浸润能力较差。因此，将基于NK细胞的疗法与其他药物联合使用，可能是释放其全部潜力的关键。

什么是NKG2D受体？它是如何发挥功能的？

 NKG2D（CD314）是NK细胞上最重要的激活受体之一。它能够识别8种应激诱导的配体，统称为NKG2D配体（NKG2DLs），包括MHC I类链相关蛋白A和B（MICA和MICB）以及UL16结合蛋白（ULBPs）。在健康组织中，NKG2DL的表达极少，但在受损、感染或转化的细胞中其表达显著上调。当NKG2D与这些配体结合时，会触发NK细胞的细胞毒性作用和细胞因子产生，从而促使异常细胞被消灭。

编码MICA和MICB的基因具有高度多态性，其变异可能影响配体的稳定性、表面表达及与NKG2D的相互作用。不幸的是，肿瘤常常利用该通路进行免疫逃逸。例如，TME中的金属蛋白酶（MMPs）可切割肿瘤表面的MICA/B，产生可溶性形式（sMICA/sMICB），这些可溶性配体会下调NK细胞上的NKG2D，从而抑制其应答能力。

肿瘤微环境如何抑制NK细胞活性？

TME对NK细胞的效力提出了多重挑战。例如，TGF-β是一种主要的免疫抑制性细胞因子，可负调控NKG2D及其他激活性受体（如NKp30和NKp46）。它还会损害NK细胞的代谢，减少糖酵解和氧化磷酸化，而这些过程对于效应功能至关重要。此外，长期的NKG2D刺激可能导致受体下调和NK细胞耗竭。

肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）通过产生抗炎细胞因子和抑制NK细胞活性，进一步加剧了免疫抑制。NK细胞上表达的其他抑制性受体——如TIGIT、CD96、NKG2A、TIM-3和LAG-3——也作为免疫检查点，成为恢复NK细胞功能的潜在靶点。例如，阻断TIGIT或NKG2A已被证明可以增强NK细胞活性，并改善对ICI的反应。

哪些治疗策略靶向NKG2D–NKG2DL轴？
目前正在开发多种创新方法以利用NKG2D通路：

靶向MICA/B的抗体
结合MICA/B的单克隆抗体可以防止蛋白水解脱落，稳定配体在肿瘤细胞上的表达，并促进抗体依赖性细胞毒性（ADCC）。例如，抗体7C6能够抑制MICA/B的脱落，并与组蛋白去乙酰酶抑制剂（HDACis）协同增强NK细胞的杀伤作用。

诱导抗MICA/B免疫的疫苗
诸如BLS-MICA之类的疫苗将MICA的胞外结构域与细菌免疫原融合，可诱导高滴度抗体，清除可溶性MICA并促进树突状细胞的交叉呈递。

采用NKG2D设计的CAR-NK和CAR-T细胞
包含NKG2D结构域的嵌合受体细胞在临床前模型中显示出增强的效应功能。在结肠癌患者中的早期临床数据表明，基于NKG2D的CAR-NK细胞能够介导肿瘤消退。

联合治疗策略

表观遗传调节剂：伏立诺他等HDAC抑制剂可上调肿瘤细胞上的MICA/B表达。

PARP抑制剂：奥拉帕利等PARP抑制剂可诱导NKG2DL表达，增强NK细胞敏感性。

STING激动剂：STING通路的激活可促进炎症信号传导和NKG2DL上调。

免疫原性细胞死亡（ICD）诱导剂：蒽环类等化疗药物可增强肿瘤免疫原性，促进NK细胞募集。

NKG2D靶向治疗的未来是什么？

未来的工作应侧重于优化联合治疗策略，以应对TME抑制并增强NK细胞的浸润和持久性。新型药物——如靶向TAM的化合物、MMP抑制剂和下一代CAR-NK设计——具有巨大前景。此外，可溶性MICA水平或免疫细胞上NKG2D表达等生物标志物，可能有助于识别最有可能从这些治疗中获益的患者。

结论

NKG2D是激活NK细胞抗肿瘤应答的关键受体。尽管肿瘤已经进化出逃避该通路的机制，但新的治疗策略正在涌现，以恢复和利用NKG2D信号。通过将靶向NKG2D的药物与免疫调节剂、表观遗传药物或细胞疗法相结合，我们有可能克服免疫抵抗，将“冷”肿瘤转化为易受免疫攻击的“热”肿瘤。NK细胞免疫治疗的未来在于综合方法，充分发挥这一强大受体-配体系统的潜力。