酵母双杂交（Y2H）与 GST Pull-down 是蛋白互作研究的两大经典上游技术：前者利用酵母转录因子 BD/AD 结构域的分离特性，通过报告基因激活实现高通量筛选未知互作蛋白，适合发现新通路成员；后者通过 GST 标签融合诱饵蛋白，在体外直接捕获并验证已知蛋白间的物理相互作用，常为初筛结果提供体外验证证据，二者常搭配使用，构成蛋白互作研究的完整上游技术链条。